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  在动物中,5mC DNA甲基化润饰(简称5mC甲基化)是一个主要而守旧的表观基因标识表记标帜茶叶商标logo,到场基因组不变性、基因转录调控、发育调控、非生物强迫呼应、代谢物分解等多种调控。茶树(Camellia sinensis(L.)O.Kuntze)是一种缺少成熟遗传转化体系的非形式作物,迄今为止,对这类主要饮料动物的表观遗传学维度的研讨很少。5mC甲基化在茶树发展发育(采前加工)和采前和采后加工中风味物资分解中的感化尚不分明。

  以国度种类“铁观音”乌龙茶为质料,采叶尺度为一芽二叶或三叶。一切新颖的叶子都鄙人午4点阁下采摘(新颖样本)。播种后的鲜叶先在阳光下萎凋35分钟,然后转移到室内萎凋15分钟(萎凋处置样本)茶叶的分类方法。萎凋后,用摇床以25 r/min对茶叶停止三次动摇(动摇处置样本)。随机收罗100g样品作为新颖、萎凋和动摇的三个处置样品,每一个处置设置三个自力的生物学反复。共搜集9个样本停止代谢组茶叶商标logo茶叶商标logo、RNA-seq和WGBS-seq测序。

  本研讨使用无偏好性的全基因组重亚硫酸盐测序(WGBS)对乌龙茶采摘后加工过程当中的四个枢纽采前构造(根、叶、花和果)和两个加工叶片停止了片面的DNA甲基化阐发。阐发成果表白,四个枢纽构造之间的差同性5mC甲基化与构造功用分化亲密相干,而且与非构造特同性表达基因比拟,卖力构造特同性功用的构造特同性基因保持相对较低的5mC甲基程度。根中CsAlaDC和TS/GS基因的低甲基化润饰为根中茶氨酸(theanine)的显性分解供给了份子根底茶叶的分类方法。别的,对收罗后叶片的5mC DNA甲基化组学、代谢组学和转录组学的综合阐发表白,乌龙茶加工过程当中风味代谢物含质变化与响应代谢物分解基因的转录程度变革亲密相干茶叶商标logo,且这些主要分解基因的转录程度变革受5mC甲基化严厉调控。进一步研讨成果表白,加工过程当中的一些枢纽基因受5mC甲基化调控茶叶的分类方法,增进α-法尼烯(α-Farnesene)茶叶的分类方法、橙花叔醇(nerolidol )、脂质(lipids)和茶多酚(catechins)等味觉物资的主要香气代谢物含质变化。本研讨成果不只阐清楚明了5mC甲基化在采前和采后加工中主要风味物资分解中的枢纽感化茶叶的分类方法,还为将来茶叶品格的改进或全构造高茶氨酸种类的选育供给了表观突变相干基因靶点。

  全基因组重亚硫酸盐甲基化测序(WGBS)能够在全基因组范畴内准确的检测一切单个胞嘧啶碱基(C碱基)的甲基化程度,是DNA甲基化研讨的金尺度。WGBS能为基因组DNA甲基化时空特同性润饰的研讨供给主要手艺撑持,能普遍使用在个别发育茶叶商标logo、朽迈和疾病等性命历程的机制研讨中,也是各物种甲基化图谱研讨的首选办法茶叶的分类方法。

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